gene a/B toxin Clostridium difficile (C.diff)
ຊື່ຜະລິດຕະພັນ
ຊຸດກວດຫາອາຊິດນິວຄລີອິກ HWTS-OT031A ສໍາລັບ gene a/B toxin Clostridium difficile (C.diff) (Fluorescence PCR)
ໃບຢັ້ງຢືນ
CE
ພະຍາດລະບາດ
Clostridium difficile (CD), gram-positive anaerobic sporogenic Clostridium difficile, ແມ່ນຫນຶ່ງໃນບັນດາເຊື້ອພະຍາດຕົ້ນຕໍທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດການຕິດເຊື້ອໃນລໍາໄສ້ nosocomial. ທາງດ້ານຄລີນິກ, ປະມານ 15% ~ 25% ຂອງພະຍາດຖອກທ້ອງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບຢາຕ້ານເຊື້ອ, 50% ~ 75% ຂອງ colitis ທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບຕ້ານເຊື້ອຈຸລິນຊີແລະ 95% ~ 100% ຂອງໂຣກ enteritis pseudomembranous ແມ່ນເກີດມາຈາກການຕິດເຊື້ອ Clostridium difficile (CDI). Clostridium difficile ແມ່ນເຊື້ອພະຍາດທີ່ມີເງື່ອນໄຂ, ລວມທັງສາຍພັນ toxigenic ແລະສາຍພັນທີ່ບໍ່ມີສານພິດ.
ຊ່ອງ
FAM | tcdAgene |
ROX | tcdBgene |
VIC/HEX | ການຄວບຄຸມພາຍໃນ |
ຕົວກໍານົດການດ້ານວິຊາການ
ການເກັບຮັກສາ | ≤-18℃ |
ອາຍຸການເກັບຮັກສາ | 12 ເດືອນ |
ປະເພດຕົວຢ່າງ | ອາຈົມ |
Tt | ≤38 |
CV | ≤5.0% |
loD | 200CFU/ml |
ສະເພາະ | ໃຊ້ຊຸດນີ້ເພື່ອກວດຫາເຊື້ອພະຍາດໃນກະເພາະລໍາໄສ້ອື່ນໆເຊັ່ນ: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, ກຸ່ມ B Streptococcus, Clostridium difficile ສາຍພັນທີ່ບໍ່ແມ່ນເຊື້ອພະຍາດ, Adenovirus, rotavirus, norovirus, influenza human virus, DNA ຜົນໄດ້ຮັບຂອງເຊື້ອໄວຣັດ B. ທັງຫມົດແມ່ນທາງລົບ. |
ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໄດ້ | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systems Applied Biosystems 7500 ລະບົບ PCR ເວລາຈິງໄວ QuantStudio®5 ລະບົບ PCR ເວລາຈິງ SLAN-96P Real-Time PCR Systems (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 ລະບົບ PCR ເວລາຈິງ LineGene 9600 Plus ລະບົບກວດຈັບ PCR ເວລາຈິງ(FQD-96A,ຫາງໂຈວເຕັກໂນໂລຊີ Bioer) MA-6000 ເຄື່ອງຈັກສູບຄວາມຮ້ອນປະລິມານຈິງ (ບໍລິສັດ Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 ລະບົບ PCR ເວລາຈິງ BioRad CFX Opus 96 ລະບົບ PCR ເວລາຈິງ |
ກະແສວຽກ
ທາງເລືອກ 1.
ຕື່ມ 180μL ຂອງ lysozyme buffer ໃສ່ precipitate (ເຈືອຈາງ lysozyme ເປັນ 20mg/mL ດ້ວຍ lysozyme diluent), pipette ປົນກັນ, ແລະປຸງແຕ່ງທີ່ 37 ° C ສໍາລັບຫຼາຍກ່ວາ 30 ນາທີ. ໃຊ້ເວລາ 1.5mL ຂອງ RNase/DNase ຕື່ມແລະທໍ່ centrifuge ທີ່ບໍ່ມີ centrifuge.180μLຂອງການຄວບຄຸມທາງບວກແລະການຄວບຄຸມທາງລົບຕາມລໍາດັບ. ເພີ່ມ10μLຂອງການຄວບຄຸມພາຍໃນກັບຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ, ການຄວບຄຸມໃນທາງບວກ, ແລະການຄວບຄຸມທາງລົບຕາມລໍາດັບ, ແລະນໍາໃຊ້ສານສະກັດຈາກອາຊິດນິວຄລີອິກຫຼື purification Reagent (YDP302) ໂດຍບໍລິສັດ Tiangen Biotech (ປັກກິ່ງ) ຈໍາກັດສໍາລັບການສະກັດເອົາ DNA ຕົວຢ່າງຕໍ່ມາ, ແລະກະລຸນາປະຕິບັດຕາມຄໍາແນະນໍາຢ່າງເຂັ້ມງວດສໍາລັບການນໍາໃຊ້ສໍາລັບຂັ້ນຕອນສະເພາະ. ໃຊ້ DNase/RNase ຟຣີ H2O ສໍາລັບ elution, ແລະປະລິມານ elution ແນະນໍາແມ່ນ 100μL.
ທາງເລືອກ 2.
ເອົາ 1.5mL ຂອງ RNase/DNase-free centrifuge tube, ແລະເພີ່ມ 200μL ຂອງການຄວບຄຸມໃນທາງບວກແລະການຄວບຄຸມທາງລົບຕາມລໍາດັບ. ເພີ່ມ10μLຂອງການຄວບຄຸມພາຍໃນກັບຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ, ການຄວບຄຸມໃນທາງບວກ, ແລະການຄວບຄຸມທາງລົບຕາມລໍາດັບ, ແລະນໍາໃຊ້ Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Kit (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) ແລະ Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid-30 (HWTS-300). ການສະກັດເອົາຄວນໄດ້ຮັບການປະຕິບັດຢ່າງເຂັ້ມງວດຕາມຄໍາແນະນໍາສໍາລັບການນໍາໃຊ້, ແລະປະລິມານ elution ແນະນໍາແມ່ນ 80μL.